bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法,也称考拍吵马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在 465nm,后者在首贺亏595nm。在一定蛋白质浓度范围内(0~100μg/ml),蛋白质-色素结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比。故可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速,其结合物在室温下1h内保持稳定。该反应非常灵敏,可测微克级蛋白质含量,所以是一种比较好的蛋白质定量法。 Lowry法是双缩脲法和福林酚法的结合与发展,其原理是:蛋白质溶液用碱性铜溶液处理,形成铜-蛋白质的络合盐,再加入酚试剂后,除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外,还使双缩脲法中肽键、碱性铜的显色效果更强烈。因此,Lowry法的显色效果比单独使用酚试剂强烈3~15倍,为双缩脲法100 倍。由于肽键显色效果增强,从而减小了因蛋白质种类引起的偏差。Lowry法的试剂由两部分组成,试剂甲相当于双缩脲试剂(碱性铜溶液),可与蛋白质中的肽键起显色反应;试剂乙为磷钨酸和磷钼酸混合液,在碱性条件下极不稳定,易者神被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物而呈蓝色反应,因此蛋白质的酪氨酸和胱氨酸等可显色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。
相关文章
-
大家对《温柔的背后》剧中卓然的看法是什么?
2023-03-21 00:35 阅读(598) -
胡锡进评郑智化《星星点灯》歌词被改,他的看法是什么?
2023-03-19 16:29 阅读(623) -
datediff函数的使用方法是如何的?
2023-03-16 02:12 阅读(646)
1 小数点加减法是什么?
588 阅读
2 词根记忆法是什么?
688 阅读
3 帽子戏法是什么意思
679 阅读
4 八二宪法是对哪一部宪法的继承和发展?
600 阅读
5 吉林自考成绩查询具体方法是什么?
669 阅读