原理:蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。双缩脲反应是指蛋才由白质在碱性溶液中与二价铜离子结合,生成紫红色络合物的反应。其颜色的深浅与蛋白质的含来自量成正比,而与蛋360问答白质的相对分子质量和氨基酸的组成无关。
操作方法,1、标准曲线的制作:于试管中分别加入0,0.2,0.4,0细停数.6,0.8,1.0ml的1%标准酪蛋白溶液,用水补足1ml。然后各加入4ml双缩脲试剂,充分摇匀在室温下反应30min,于540nm波长下测定光吸收率。以酪蛋白的含量为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。
2、样品测定
取样品溶须定液1ml加入4ml双缩脲试剂明来胜括行,摇匀后在室温下反应3轴便鲁证助减矛0min,测定光吸收值案活菜外乙通子,从标准曲线查出蛋白质含量。
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